仪器、器材和试剂

5.1仪器、器材    显微镜  改良Neubauer血细胞计数板一次性20ul定量取血管 洁净小试管

5.2 试剂：赫姆（Hayem）液：

氯化钠    1.0g   结晶硫酸钠（Na2SO4.10H2O）   5.0g（或无水硫酸钠 2.5g）

氯化高汞  0.5g   蒸馏水    加至200ml溶解后加20g/L伊红水溶液1滴，过滤后用。

7.2试剂准备取小试管1支，加红细胞稀释液2.0 ml

7.3样本混匀 将EDTA-K₂抗凝静脉血或毛细血管血充分混匀。

7.4 样本稀释及充池 用清洁干燥微量吸管取末梢血10ul 。擦去管尖内外部余血，轻轻吹入红细胞稀释液底部，再轻吸上层清液嗽洗吸管2--3次，然后立即混匀。

7.5 计数 充池后待2--3 min，用高倍镜依此计数中央大方格内四角和正中5个中方格内的红细胞。按数上不数下，数左不数右的原则进行目视计数。

7.6计算计数结果 红细胞/L=5个中方格内红细胞数X  5 X 10 X 201 X 10⁶

         （或红细胞数/L=5个中方格内红细胞/100 X 10¹² ）

7.7分析评审检验结果，评价其与可利用的患者有关临床信息的符合性，审核签发报告。

8 质量控制程序

8.1稀释用吸管、微量吸管、血细胞计数板均为计量工具，使用前需要经过严格的校正，否则将直接影响计数结果的准确。

8.2在充池时，如充液不足、液体外溢、断续充液、或产生气泡、充液后移动盖玻片等，均会使细胞分布不均匀，造成计数结果不准确。

8.3计数大小方格内的压线细胞时，遵循数上不数下，数左不数右的原则。

8.4细胞计数时掌握误差规律，严格遵守操作规程，减少误差，以获得准确的结果。

8.5经验控制

①正常数值范围内，两次红细胞计数相差不得超过 5% 。

②如无上述稀释液，也可用新鲜配制的等渗盐水代用,或直接取血液分析仪用稀释液。

9 测量不确定度

参照CLIA＇88推荐的允许误差，确定本室白细胞显微镜计数相对扩展不确定度：±6.0%

10 生物参考区间：

     男：( 4.0--5.5 ) X10¹²/L  

     女：( 3.5--5 ) X10¹²/L  

     新生儿：( 6--7 )10¹²/L

11 检验结果的可报区间

RBC：（0.0～8.0）×10¹²/L

12 警告/危急值：  

按《危急值报告程序》处理。

13 实验室的结果解释

增加或减少见血红蛋白测定。一般情况下红细胞数与血红蛋白浓度之间有一定的比例关系，但在部分贫血患者，同时测定二者，对贫血诊断和鉴别诊断有帮助.

15 干扰因素、交叉反应及潜在误差来源

15.1如无上述稀释液，也可用新鲜配制的等渗盐水代用,或直接取血液分析仪用稀释液。

15.2正常数值范围内，两次红细胞计数相差不得超过 5% 。

15.3手指采血时不能挤压过甚，针刺深度必须适当。

15.4大小方格内压线细胞应按数上不数下、数左不数右的原则进行计数。

15.5所用微量吸管和计数板必须为校正品。

15.6操作人员必须能熟练掌握每步骤的操作技能。